RMMG - Revista Médica de Minas Gerais

Volume: 28 e-1957 DOI: http://www.dx.doi.org/10.5935/2238-3182.20180047

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Artigo Original

Avaliaçao da contaminaçao microbiana em computadores utilizados em um hospital público da cidade de Juiz de Fora

Assessment of microbial contamination in computers used in a public hospital in the city of Juiz de Fora

Patrícia Guedes Garcia1, Gabriela Souza Barbosa2, Leandro Oliveira de Morais3, Laura Alcântara Damianse4, Leonardo Romaniello Gama de Oliveira5

1. Faculdade de Ciências Médicas e da Saúde de Juiz de Fora - SUPREMA, Departamento de Microbiologia. Juiz de Fora, Minas Gerais - Brasil
2. Prefeitura de Santana do Deserto, Farmacêutica Responsável. Santana do Deserto, Minas Gerais - Brasil
3. Hospital e Maternidade Therezinha de Jesus, Laboratório de Análises Clínicas. Juiz de Fora, Minas Gerais - Brasil
4. Faculdade de Ciências Médicas e da Saúde de Juiz de Fora - SUPREMA, Curso de Medicina. Juiz de Fora, Minas Gerais - Brasil
5. Faculdade de Ciências Médicas e da Saúde de Juiz de Fora - SUPREMA, Curso de Medicina. Juiz de Fora, Minas Gerais - Brasil

Endereço para correspondência

Patrícia Guedes Garcia
E-mail: pgglab@hotmail.com; leonardogama8@gmail.com

Recebido em: 09/12/2017
Aprovado em: 18/06/2018

Instituiçao: Faculdade de Ciências Médicas e da Saúde de Juiz de Fora - SUPREMA, Curso de Medicina. Juiz de Fora, Minas Gerais - Brasil

Resumo

INTRODUÇAO: Infecçoes Relacionadas à Assistência à Saúde representam um problema de saúde pública, sendo causadas por diversos microrganismos. Teclados de computadores sao fabricados com materiais plásticos que favorecem a permanência de bactérias patogênicas.
OBJETIVOS: Pesquisar e avaliar o perfil de resistência de bactérias patogênicas isoladas em teclados e mouses utilizados em um hospital de Juiz de Fora.
MÉTODOS: Foram coletadas 110 amostras (55 de teclados e 55 de mouses), com swab estéril em meio Stuart. Estas foram inoculadas em caldo BHI, incubadas por 24 horas em estufa de aerobiose, à 35ºC. Foram repicadas em Agar Manitol Salgado, Agar MacConkey e Agar Sangue e incubadas por 24-48 horas, em aerobiose, a 35º ± 2ºC. Colônias presentes nos meios de cultura foram identificadas por provas bioquímicas e fisiológicas e submetidas ao teste de sensibilidade aos antimicrobianos.
RESULTADOS: Foram analisados 55 teclados e 55 mouses utilizados nos setores do hospital. Das 110 amostras coletadas, 39 (35,45%) apresentaram crescimento bacteriano, sendo 21 (19,09%) em teclados e 18 (16,36%) em mouses. Com relaçao aos microrganismos encontrados, houve prevalência de: Enterobacter cloaceae, S. aureus, Stenotrophomonas maltophilia, Acinetobacter sp, Enterococcus sp., Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, e Klebsiella oxytoca.
CONCLUSOES: Foi possível observar altas taxas de contaminaçao por bactérias patogênicas nos teclados e mouses do hospital, apresentando grande relevância o controle destes microrganismos nas IRAS e na disseminaçao de bactérias patogênicas, sendo um desafio e uma prioridade para as instituiçoes de saúde.

Palavras-chave: Computadores. Infecçao Hospitalar. Resistência Microbiana a Medicamentos.

 

INTRODUÇAO

Infecçoes Relacionadas à Assistência à Saúde (IRAS) referem-se àquelas adquiridas durante a prestaçao dos cuidados de saúde, após admissao do paciente, durante a internaçao ou após a alta.1Representam um importante problema de saúde pública, tanto nos países desenvolvidos como em países em desenvolvimento, pois aumentam as taxas de morbidade e de mortalidade, prolongam o período de internaçao e elevam os custos hospitalares.1,2

Apesar dos importantes avanços alcançados no controle das infecçoes, estudos demonstram a emergência do problema globalmente, pelo aumento acentuado da frequência e da gravidade dos casos de IRAS, o que pode ter sido favorecido pela disseminaçao de microrganismos resistentes, pelo fato da nao adesao dos profissionais às medidas de biossegurança, a sobrecarga de trabalho e, por vezes, o número reduzido de recursos humanos.3,4

As IRAS sao causadas por diversos microrganismos, com predomínio de bactérias Gram-negativas. Aquelas de maior relevância clínica e epidemiológica em ambientes hospitalares sao as enterobactérias como Escherichia coli, Proteus sp., Serratia marcescens, Enterobacter sp. e Klebsiella pneumoniae e os microrganismos nao fermentadores de glicose como Pseudomonas sp., Stenotrophomonas sp., Burkholderia sp. e Acinetobacter sp.5

A contaminaçao do ambiente hospitalar por bactérias Gram-positivas como Staphylococcus aureus resistente a meticilina (MRSA) e Enterococcus resistente a vancomicina (VRE), especialmente em situaçao epidêmica, tem sido frequentemente descrita. A proporçao de superfícies hospitalares contaminadas com MRSA tem variado consideravelmente de 1% a 27% em quartos hospitalares a 64% de superfícies em Unidades de Queimados com pacientes portando MRSA. Por conseguinte, a contaminaçao ambiental pode contribuir na transmissao de microrganismos epidemiologicamente importantes na gênese de infecçoes hospitalares.6

Há evidências na literatura de que superfícies ambientais contaminadas com microrganismos podem contribuir para a transmissao desses patógenos quando associados aos cuidados de saúde.6 Essas superfícies desempenham um papel significante na ocorrência da transmissao cruzada, pois atuam como fontes constantes de contaminaçao, inclusive pelo contato das maos dos profissionais com os pacientes e pelo contato direto do paciente com material ou ambiente contaminado.6,7

O avanço técnico-científico permitiu um aumento dos sistemas de informatizaçao clínica, tendo por objetivo a automaçao de todas as rotinas administrativas do hospital.8,9 Alguns estudos têm enfatizado a contaminaçao de objetos inanimados em uso nos ambientes hospitalares, assim como telefones, computadores, estetoscópios e inclusive aqueles equipamentos presentes nos leitos dos pacientes.8

 

MÉTODOS

Avaliou-se a presença de microrganismos em teclados e mouses de computadores utilizados em um hospital público de Juiz de Fora, Minas Gerais.

As amostras foram coletadas entre fevereiro e março de 2015, com swab estéril com meio Stuart (Labor® Swab). Este foi friccionado contra a superfície dos teclados. Após a coleta, as amostras foram encaminhadas ao laboratório de microbiologia da Faculdade de Ciências Médicas e da Saúde de Juiz de Fora.

As amostras foram inoculadas em caldo BHI (Mbiolog diagnósticos Ltda. ®), incubadas por 24 horas em estufa de aerobiose, (Fanem® 502 Sao Paulo - Brasil), a 35ºC ± 1. Após este período, foram repicadas em Agar Manitol Salgado (RenyLab®, Química e Farmacêutica), Agar Sangue 5% (RenyLab®, Química e Farmacêutica) e Agar MacConkey (RenyLab®, Química e Farmacêutica), incubadas por 24-48 horas, em aerobiose, a 35º ± 1ºC e realizadas as provas bioquímicas para a identificaçao de cada espécie.10,11

Para identificaçao de Staphylococcus aureus foi utilizada a fermentaçao do manitol, catalase e coagulase. Já para Enterococcus sp, utilizaram-se as provas da catalase, NaCl 6,5% e bile esculina.10,11

Para identificar os bastonetes Gram-negativos foram utilizados prova do OF, IAL, citrato, arginina, ornitina, lisina, motilidade, oxidase e polimixina B.10,11

As bactérias identificadas foram submetidas ao teste de sensibilidade aos antimicrobianos (TSA) pelo método de Agar Difusao em Disco, de acordo com a padronizaçao do CLSI 2014 - Clinical Laboratory Standards Institute.12

 

RESULTADOS

Foram analisados 55 teclados e 55 mouses (110 amostras) utilizados em diferentes setores do hospital: Biblioteca (22 amostras), Unidade de Terapia Intensiva de Trauma-UTIT (14 amostras), Unidade de Terapia Intensiva Neonatal-UTINEO (8 amostras), Unidade de Terapia Intensiva de Clínica Médica-UTICM (16 amostras), Serviço de Controle de Infecçao Hospitalar-SCIH (6 amostras), Internaçao 1-INT1 (4 amostras), Internaçao 2-INT2 (10 amostras), Internaçao 3-INT3 (10 amostras), Internaçao 4-INT4 (6 amostras), Internaçao 5-INT5 (6 amostras) e Sala de Prescriçao Médica-SPM (8 amostras).

Das 110 amostras coletadas, em 39 (35,45%) houve crescimento de bactérias, sendo 21 (19,09%) em teclados e 18 (16,36%) em mouses. Em relaçao às amostras positivas por setores, a prevalência foi de 66,66% na SCIH, 62,50% na UTICM, 50% na INT1, 45,45% na Biblioteca, 40% na INT2, 33,33% na INT4, 28,57% na UTIT, 20% na INT3, 12,5% na SPM, como descrito na Figura 1. Em 5,45% das amostras houve crescimento de mais de uma espécie bacteriana, e na INT5 e UTINEO nao houve crescimento em nenhuma amostra coletada.

 


Figura 1. Porcentagem de crescimento microbiano nos teclados e mouses distribuídos por setores do hospital. Os autores.

 

Os resultados apresentados consideraram somente o isolamento de S. aureus, bastonetes Gram-negativos fermentadores e nao fermentadores e Enterococcus sp.

Com relaçao aos microrganismos bacterianos encontrados, dentre as 39 amostras positivas de teclados e mouses, 47 cepas foram identificadas, com prevalência de 10 cepas (21,3%) de Enterobacter cloacea, 9 (19,1%) de S. aureus, 7 (14,9%) de Stenotrophomonas maltophilia, 7 (14,9%) de Acinetobacter sp., 7 (14,9%) de Enterococcus sp., 3 (6,4%) de Escherichia coli, 3 (6,4%) de Klebsiella pneumoniae, e 1 (2,1%) de Klebsiella oxytoca como demonstrado na Figura 2.

 


Figura 2. Número de espécies bacterianas encontradas nos teclados e mouses dos computadores de um hospital público da cidade de Juiz de Fora/MG. Os autores.

 

Foram encontrados na SCIH 33,33% de Acinetobacter sp., 33,3% de K. pneumoniae e 33,3% de S. aureus. Na UTICM a prevalência foi de 40,0% de S. aureus, 33,3% de Enterococcus sp., 13,3% S. maltophilia, 6,7% de K.oxytoca e 6,7% de Acinetobacter sp.. Na INT1 o crescimento foi de 100,0% de S. maltophilia, e na biblioteca foi de 90,0% de E. cloacea e 10,0% de Acinetobacter sp.. Na INT2 foi de 50% de Acinetobacter sp., 25% de Enterococcus sp.e 25% de E. Coli, e na INT4 de 33,3% S. aureus, 33,3% Acinetobacter sp. e 33,3% E. Coli. Na UTIT 75,0% foi S. maltophilia e 25,0% de K. pneumoniae. Na internaçao 3, 50,0% de E. coli e 50,0% de Enterococcus sp., e na SPM 100,0% de E. cloacea, conforme Tabela 1.

 

 

Foi realizado o Teste de Sensibilidade aos Antimicrobianos (TSA), para avaliar o perfil de resistência das bactérias encontradas. Os antimicrobianos testados foram de acordo com a padronizaçao do CLSI 2014, conforme Tabela 2.

 

 

Para família Enterobacteriaceae, testaram-se os antimicrobianos: piperacilina + tazobactam, ceftazidma, ceftriaxona, cefepime, aztreonam, ertapenem, meropenem, imipenem, gentamicina, amicacina, sulfametoxazol + trimetoprin e levofloxacin. As cepas de K. pneumoniae foram, uma betalactamase de espectro estendido (ESBL) e duas Klebsiella pneumoniae carbapenemase (KPC), e apresentaram 33,40% de resistência para piperacilina+tazobactam e gentamicina, 66,60% de resistência para meropenem, imipenem, ertapenem e sulfametoxazol + trimetoprim e 100% de resistência para ceftazidima, ceftrixona, cefepime e aztreonam. A cepa de K. oxytoca foi ESBL, apresentando 100% de resistência para ceftazidima, ceftrixona, cefepime e aztreonam. As cepas de E. cloacae e E. coli, nao apresentaram resistência a nenhum antimicrobiano testado.

Para Acinetobacter sp foram testados: piperacilina + tazobactam, ceftazidma, ceftriaxona, cefepime, aztreonam, meropenem, imipenem, gentamicina, amicacina, sulfametoxazol + trimetoprin, levofloxacin, ampicilina + sulbactam, ticarcilina + clavulanato, tetraciclina. O resultado para as cepas isoladas foi de 28,57% de resistência a ampicilina + sulbactam, 42,85% para amicacina, gentamicina e tetraciclina e 57,14% para ceftazidima, ceftriaxona, cefepime, piperacilina + tazobactam, ticarcilina + clavulanato, meropenem, imipenem, sulfametoxazol + trimetoprim e levofloxacin.

Todas cepas de S. maltophilia foram sensíveis a levofloxacin e sulfametoxazol + trimetoprin.

Para S. aureus, foram testadas penicilina, oxacilina, ceftriaxona, cefepime, cloranfenicol, levofloxacin, amicacina, clindamicina, eritromicina, sulfametoxazol + trimetoprin, teicoplamina e linezolida, e para Enterococcus sp., tetraciclina, cloranfenicol, ampicilina, penicilina, levofloxacin, linezolida, teicoplamina e vancomicina. O perfil de resistência foi 11,11% para amicacina, 22,22% para cloranfenicol, 33,33% para levofloxacin, 77,77% para penicilina, oxacilina, cefepime, ceftriaxona e sulfametoxazol + trimetoprim, e 100% para clindamicina e eritromicina. Dentre as nove cepas de S. aureus, 77,77% (7) apresentaram resistência a cefoxitina, MRSA.

Para as cepas de Enterococcus sp. foram testadas ampicilina, penicilina, linezolida, teicoplamina, vancomicina, tetraciclina, levofloxacin e cloranfenicol. O perfil de resistência foi de 14,28% para tetraciclina e 71,42% para levofloxacin e cloranfenicol.

Para as duas cepas de K. pneumoniae resistentes aos carbapenêmicos, foram feitos testes fenotípicos de Hodge e ácido fenilborônico (AFB), para detecçao da enzima Klebsiella pneumoniae carbapenemase (KPC), segundo o CLSI 2014 e a nota técnica da ANVISA 001/2013.13,14 Tanto o teste de Hodge, quanto a pesquisa de carbapenemases pelo método do ácido fenilborônico foram positivos para presença de KPC (Figura 3).

 


Figura 3. Teste de Hodge modificado e pesquisa da enzima carbapenemase pelo método de AFB usado como teste confirmatório para pesquisa de KPC. Os autores.

 

DISCUSSAO

A contaminaçao por microrganismos pode ocorrer na maior parte dos ambientes, sendo esta intimamente ligada à higiene local. Sabe-se que a sobrevivência de tais patógenos no ambiente pode variar de minutos a meses, sendo que objetos de uso rotineiro, tais como os teclados, podem se tornar focos de transmissao a hospedeiros.14

Em todas as amostras foram observados crescimentos de Staphylococcus sp coagulase negativa (SCN). Os SCN sao facilmente encontrados, visto que faz parte da microbiota da pele e nao representa, necessariamente, risco à saúde dos usuários hígidos.15,16,17

Detectou-se, através do TSA, a presença de MRSA em 7 (77,77%) cepas de S. aureus isoladas. Um estudo microbiológico de 2011 realizado em superfícies de leitos da UTI de um hospital escola em Três Coroas - MG, totalizou 63 amostras e das 48 amostras positivas para S. aureus, 29 (60,4%) foram resistentes à meticilina.

A resistência do S. aureus aos antimicrobianos tem sido desenvolvida por mutaçoes em seus genes ou pela aquisiçao de genes de resistência de outras bactérias da mesma espécie (ou ate de outras). A literatura descreve que a resistência a meticilina é determinada por um gene cromossômico (mecA) bacteriano, o qual codifica modificaçoes no receptor do betalactâmico, estimulando a produçao de uma proteína ligadora de penicilina (PPB2a) com baixa afinidade pelo antimicrobiano, resultando na resistência. Geralmente, a resistência que ocorre por mutaçao gera uma alteraçao no sitio de açao do antimicrobiano, enquanto a resistência por aquisiçao de genes de resistência frequentemente envolve a inativaçao ou a destruiçao da droga, sendo transmitida por plasmídeos e transposons.18

Das sete cepas de Enterococcus sp. encontradas, todas apresentaram sensibilidade à vancomicina. Um estudo de 2006 analisou 50 amostras de teclados em um hospital e isolou 12 cepas de Enterococcus sp., nenhuma apresentou resistência à vancomicina.9 Outro estudo, de 2013, concebido em um leito de uma UTI adulta em um hospital do Vale do Rio Pardo - RS, encontrou-se apenas uma cepa de Enterococcus sp., sendo esta sensível à vancomicina, o que corrobora com os resultados evidenciados.19

Enterococcus sp. pode sobreviver por longos períodos em diversas superfícies e solos, dentro de esgotos e hospitais, crescendo a temperaturas entre 10 e 45°C de ambientes básicos ou ácidos, isotônicos ou hipertônicos, manifestando alta resistência às drogas (vancomicina, penicilina, gentamicina, tetraciclina, eritromicina e teicoplanina), devido nao só a genes cromossômicos que codificam resistência, mas também a plasmídeos e transposons conjugativos.8

A colonizaçao ou infecçao por VRE tem sido associada a uma variedade de fatores, incluindo tempo de internaçao hospitalar, doença de base e transplante hepático. Pacientes colonizados por VRE carregam o microrganismo em sua microbiota intestinal e podem permanecer colonizados por até dois anos. Após sua introduçao em determinado hospital, o Enterococcus sp. apresenta grande capacidade de disseminaçao, criando um perfil de endemicidade que dificulta tentativas de erradicaçao posterior.19

Observou-se o crescimento de cepas da família Enterobacteriaceae, sendo E. cloacae o mais isolado, com prevalência de nove cepas (21,3%), que nao apresentaram resistência aos antimicrobianos testados. Infecçoes causadas pelos microrganismos do gênero Enterobacter sao raras nos pacientes imunocompetentes.

Nesse trabalho foram isoladas três cepas de E. coli, que nao apresentaram resistência em nenhum dos antimicrobianos testados. Das três amostras de K. pneumoniae isoladas, uma foi ESBL e duas foram KPC. A resistência aos carbapenêmicos tem sido codificada por diversos genes, principalmente blaKPC.14

A produçao de ESBL é um mecanismo de resistência em enterobactérias. O tratamento de infecçoes causadas por cepas produtoras de ESBL oferece um substancial desafio à terapia antimicrobiana, pois as ESBLs hidrolisam penicilinas, cefalosporinas de todas as geraçoes e monobactâmicos, minimizando opçoes terapêuticas. Ademais, o uso contínuo e inadequado de agentes antimicrobianos pode induzir à seleçao de cepas multirresistentes.20

Detectou-se também uma cepa de K. oxytoca produtora de ESBL, que apresentou 100% de resistência as cefalosporinas de 3ª e 4ª geraçao e aztreonam. Um estudo realizado de 2012 pesquisou ESBL em E. coli e Klebsiella sp isoladas em superfícies inanimadas em um hospital do Peru. Das 125 amostras obtidas, isolou-se 20 cepas de E.coli, 19 cepas de K. pneumoniae e 4 cepas de K. oxytoca. Cinco cepas de E. coli e 11 cepas de Klebsiella sp foram produtores de ESBL, com exceçao de uma cepa de E. coli e uma K. oxytoca, todas as outras cepas foram resistentes às cefalosporinas de 3ª geraçao, aztreonam e cefepime.21

As duas cepas K. pneumoniae isoladas resistentes aos carbapenêmicos foram submetidas a pesquisa fenotípica de KPC através dos testes de Hodge modificado e AFB, sendo que os dois testes foram positivos para a presença de KPC.

A enzima KPC é produzida por bactérias Gram-negativas (Enterobactérias), e sua detecçao em isolado bacteriano confere resistência aos antimicrobianos carbapenêmicos, além de inativar penicilinas, cefalosporinas e monobactâmicos. É importante salientar que os carbapenêmicos compreendem uma classe amplamente utilizada no tratamento de infecçoes envolvendo Enterobacteriaceae multirresistente. Vários sao os mecanismos de resistência que podem impedir a açao dos carbapenêmicos, e a resistência surge, ocasionalmente, da combinaçao de impermeabilidade da membrana com betalactamases cromossômicas (AmpC) ou de amplo espectro (ESBL), gerando pequena hidrolise de carbapenêmicos e, ainda, alteraçao nos canais de porina, que modificam a açao e a penetraçao dos fármacos.22,23,24

Estudos têm comprovado a emergência dos bastonetes gram-negativos nao fermentadores como causadores de IRAS mundialmente, sendo Pseudomonas sp. e Acinetobacter sp. os mais frequentes. O crescimento microbiano predominante de Acinetobacter sp. multirresistente nas superfícies de materiais e equipamentos mostra a relevância deste patógeno no contexto hospitalar, uma vez que as estas cepas tem capacidade de sobreviver em superfícies secas por períodos longos de tempo, mantendo sua capacidade de multiplicaçao e infectividade.

Neste estudo foram encontradas sete cepas (14,9%) de Acinetobacter sp., que apresentaram elevado perfil de resistência para todas as cefalosporinas testadas e aos carbapenêmicos. Um estudo realizado no hospital de emergência no Sul do Brasil, em 2010 pesquisou a presença dos genes responsáveis pelo mecanismo de resistência e verificou-se que as cepas de Acinetobacter sp. encontradas apresentavam sensibilidade reduzida as cefalosporinas de terceira geraçao (ceftazidima e ceftriaxona), além de apresentarem resistência ao imipenem.25

Foram encontradas sete cepas (14,9%) de S. maltophilia, sendo que todas apresentaram sensibilidade a levofloxacin e a sulfametoxazol + trimetoprim.  Em 2011, um estudo avaliou o perfil de sensibilidade das cepas de S. maltophilia isoladas no Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da Universidade de Sao Paulo, e, o perfil de sensibilidade apresentado pelos isolados de S. maltophilia neste estudo foi compatível com o característico desse agente, apresentando baixos níveis de sensibilidade aos antimicrobianos betalactâmicos e betalactâmicos associados a inibidores de betalactamase e melhor sensibilidade a sulfametoxazol + trimetoprim e fluoroquinolonas.26

Os resultados encontrados no presente estudo sao semelhantes àqueles encontrados pela maioria dos autores que estudaram e isolaram bactérias patogênicas das superfícies inanimadas dos mais variados ambientes, e se tratando de superfícies secas, revela uma maior persistência no plástico, material usado na fabricaçao de teclados e mouses. Amostras microbiológicas de superfícies podem ser úteis nas investigaçoes epidemiológicas que sugerem o ambiente ou superfícies como sendo possíveis reservatórios ou fontes de transmissao de doenças nosocomiais.

 

CONCLUSAO

Foi possível observar contaminaçao por bactérias patogênicas nos teclados e mouses nos diversos setores do hospital. A contaminaçao de computadores corrobora a hipótese de que superfícies muito tocadas se tornam mais contaminadas. Tal premissa reforça a ideia de que muitas vezes os profissionais, após tocar um paciente, nao se atêm à importância da higienizaçao das maos e retomam as atividades sem se dar conta da possibilidade de disseminar microrganismos.

As cepas bacterianas isoladas apresentaram alta taxa de resistência bacteriana, sendo possível observar mecanismos de resistência como ESBL, KPC e MRSA.

Dessa forma, considerando todas as possibilidades dos microrganismos isolados neste trabalho de manifestarem resistência aos antimicrobianos, favorecendo a infecçao em pacientes imunocomprometidos, é de suma importância que os componentes da comissao de infecçao hospitalar incluam entre os materiais vistoriados em suas inspeçoes também os teclados e mouses. Isso deve ser associado à orientaçao dos trabalhadores das unidades de saúde sobre quais protocolos seguir para evitar futuros casos de infecçoes nosocomiais.

 

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